液相色譜儀是利用不同待分離物質(zhì)在兩相中的親和力差異,如分配系數(shù)、吸附容量等。利用外力,含有樣品的流動相(氣體、液體)通過固定在柱或平板上的固定相表面,該固定相與流動不相溶。當流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時,混合物中的組分與固定相相互作用。
為了保證液相色譜儀使用的穩(wěn)定性,我們對于設(shè)備使用環(huán)境是有一定要求的,包括:通風、照明、供電、環(huán)境溫度和濕度以及潔凈度,其中:
1、通風:使用液相色譜儀分析過程中,由于流動相中含有揮發(fā)性有機溶劑(甲醇、乙睛等)會產(chǎn)生有害氣體,對儀器中的光學元件帶來腐蝕,應(yīng)注意儀器室的通風,以排除室內(nèi)有害氣體、保持空氣清新。通風主要有兩種方式:一種自然通風,定時打開門窗,讓內(nèi)外空氣對流;另一種是強制通風,如用通風柜、排風扇等,及時將有害氣體排出室外。
2、照明:室內(nèi)照明要光線適中,避免陽光直射。為避開直射光線對儀器操作、觀測的影響,儀器(顯示屏)應(yīng)側(cè)向光線。實驗室窗戶要掛窗簾,以便隨時調(diào)節(jié)光照強度。
3、供電:液相色譜室應(yīng)設(shè)有照明電源和動力電源,動力電可供儀器運行使用。為減少噪音的干擾,且儀器應(yīng)遠離瞬時供電的大功率電器設(shè)備,如大型電動設(shè)備、電梯、空調(diào)系統(tǒng)等。為保證HPLC輸液泵的精度,必須要保證穩(wěn)定的輸人電壓,為此,建議色譜室應(yīng)設(shè)有和儀器負荷相當?shù)姆€(wěn)壓電源。
4、環(huán)境溫度和濕度:適宜的溫度和濕度是保障HPLC儀正常運行、性能穩(wěn)定的必要條件。一般要求室溫在20一30℃之間,日溫度變化2一3℃,不要波動太大,否則,在開機分析時會影響色譜分離,夏季一定要控制室溫不要超過30℃,溫度太高會使流路系統(tǒng)產(chǎn)生氣泡,影響檢測器的正常工作(如熒光檢測器)。室內(nèi)相對濕度應(yīng)控制在60%以下。
5、潔凈度:懸浮于空氣中的顆粒物質(zhì)會對色譜儀器分析帶來干擾,使本底和噪聲升高,成為分析測試的污染源,直接影響高純物質(zhì)的純度與痕量雜質(zhì)的分析。